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摘要
目的 探讨活化T细胞核因子5（nuclearfactorofactivatedTcells5，NFAT5）对高糖诱导人肾小管上皮HK-2细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）的影响以及益糖康改善高血糖对肾脏早期损伤的作用机制。方法 SD雄性大鼠20只，随机分成生理盐水组和益糖康组，每组10只。生理盐水组给予1mL/100g生理盐水灌胃，益糖康组给予2.10g/100g益糖康煎剂灌胃，连续5d，腹主动脉取血，离心分离上清。通过高糖诱导HK-2细胞构建早期糖尿病肾病体外模型，并加入相应的药物进行干预。分别采用qRT-PCR和Westernblot实验检测转染NC-siRNA（NC-siRNA组）/NFAT5-siRNA（NFAT5-siRNA组）或生理盐水含药血清处理（NS组）/益糖康含药血清处理（YTK组）以及益糖康含药血清处理同时转染GV492-Empty（YTK+GV492-Empty组）/GV492-NFAT5（YTK+GV492-NFAT5组）细胞中NFAT5、E-cadherin以及VimentinmRNA和蛋白表达水平的改变。再分别采用划痕和Transwell实验检测各组细胞迁移力和侵袭力的改变。结果 转染NFAT5-siRNA能够明显抑制NFAT5mRNA（P<0.01）和蛋白（P<0.05）的表达；与NC-siRNA组相比较，NFAT5-siRNA组细胞中E-cadherinmRNA（P<0.05）和蛋白（P<0.01）的表达水平显著升高，VimentinmRNA（P<0.05）和蛋白（P<0.01）的表达水平显著降低，细胞的迁移力（P<0.05）和侵袭力（P<0.01）均明显减弱。与NS组相比较，YTK组细胞中NFAT5mRNA（P<0.05）和蛋白（P<0.05）的表达水平明显降低。转染GV492-NFAT5能够明显促进NFAT5mRNA（P<0.01）和蛋白（P<0.01）的表达；与YTK+GV492-Empty组相比较，YTK+GV492-NFAT5组细胞中E-cadherinmRNA（P<0.01）和蛋白（P<0.01）的表达水平显著降低，VimentinmRNA（P<0.05）和蛋白（P<0.01）的表达水平显著升高，细胞的迁移力（P<0.05）和侵袭力（P<0.05）均明显增强。结论在高糖环境下，NFAT5会促进人肾小管上皮细胞发生EMT；益糖康能够通过下调NFAT5表达抑制肾小管上皮细胞发生EMT从而改善高血糖对肾脏的早期损伤。
- 出版日期2023
- 单位辽宁中医药大学
