兰州鲇(CAG)_n、(GATA)_n微卫星文库构建与鉴定

作者：魏大为; 连总强; 吴旭东; 张利平; 肖伟; 赛清云; 王发新

来源：淡水渔业, 2014, (05): 15-20.

DOI：10.13721/j.cnki.dsyy.2014.05.003

• 兰州鲇(Silurus lanzhouensis)
• 磁珠富集
• 微卫星 Silurus lanzhouensis
• magnetic bead enrichment
• microsatellites

应用磁珠富集法构建兰州鲇(Silurus lanzhouensis)CAG重复和GATA重复的微卫星文库,并分析其序列特征。兰州鲇基因组DNA经MseI酶切,选取200~800 bp的片段与生物素标记的探针(CAG)8和(GATA)6杂交,捕获到含有微卫星序列的目的 DNA片段连接到pMD19-T载体,转化到大肠杆菌DH5α菌株中构建微卫星富集文库,经PCR检测筛选出阳性克隆进行测序。从126个阳性克隆中随机选取96个进行测序,获得59个微卫星序列(GenBank登录号:KJ545973~KJ545998,KJ598088~KJ598120)。其中完美型31个(52.54%)、非完美型20个(...

• 出版日期2014
• 单位甘肃农业大学; 宁夏回族自治区水产研究所