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摘要
目的研究十六烷酸对谷氨酸损伤PC12细胞凋亡的保护作用。方法将PC12细胞分为7组:正常对照组,二甲基亚砜溶剂对照组,模型对照组(25 mmol·L-1谷氨酸),阳性药物对照组(7μmol·L-1尼莫地平或10μmol·L-1MK801)以及十六烷酸组(1、10、100μmol·L-1)。噻唑蓝法验证十六烷酸对谷氨酸损伤PC12细胞保护作用;乳酸脱氢酶比色法、台盼蓝染色法检测不同浓度十六烷酸对谷氨酸损伤PC12细胞膜通透性变化的影响;AO/EB、Hoechst荧光染色法观察PC12细胞凋亡的形态。FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞仪检测细胞凋亡率。Western blot法检测细胞内Bcl-2、Bax、GluR1蛋白表达。结果噻唑蓝、台盼蓝染色计数、细胞上清液中乳酸脱氢酶含量显示:与谷氨酸模型组相比,十六烷酸能明显改善谷氨酸损伤PC12细胞的活力,减少细胞膜通透性;AO/EB荧光染色显示谷氨酸损伤后,模型对照组可见大部分细胞经AO染色后核染色质部分呈现浓染,十六烷酸各组仅出现少数被EB染成橘红色的细胞;Hocehst荧光染色显示,与模型组相比十六烷酸组细胞核发出蓝色荧光较弱。十六烷酸能上调Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达;并能抑制谷氨酸导致的谷氨酸受体的过度表达。结论十六烷酸对谷氨酸损伤PC12细胞凋亡具有保护作用,该保护与抑制谷氨酸受体蛋白NMDA、Bax蛋白的表达的增加,上调Bcl-2蛋白表达等有关。
- 出版日期2015
- 单位安徽中医药大学
