转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法的建立

作者：刘二龙; 卢丽; 吕英姿; 蒋湘; 张旺; 林惠娇; 郑高彬; 唐婕; 林学勤; 秦焯敏

来源：食品安全质量检测学报, 2015, 6(01): 272-278.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2015.01.048

• 实时荧光PCR
• 转基因苜蓿J163
• 品系特异性

目的建立针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的转基因苜蓿草品系J163品系特异性实时荧光(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测方法。方法利用Taq Man实时荧光PCR(real-time PCR)技术,根据转基因苜蓿草品系J163 5’端外源插入片段P-e FMV与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物和探针,建立了转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度及可重复性进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J163成分检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为15 pg,相当于9拷贝转基因苜蓿草J163基因组DNA,重复性试验显示,其标准偏差(Standard deviation,SD)和相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均在可接受范围内。结论本研究建立的转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确、稳定地对转基因苜蓿草J163成分进行检测分析。

• 出版日期2015
• 单位中华人民共和国广东出入境检验检疫局; 陕西省动物研究所