mTSARG3真核表达载体的构建及其稳定转染细胞系的建立

作者：**; 卢光琇

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2010, (09): 839-841+845.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005536

• mTSARG3基因
• 转染
• GC-1 spg mTSARG3
• transfection
• GC-1 spg

目的:构建小鼠mTSARG3基因真核表达载体,转染小鼠精原细胞系GC-1,建立稳定转染mTSARG3的GC-1细胞系,利用流式细胞技术(FCM)进行初步功能研究。方法:应用RT-PCR从小鼠睾丸cDNA文库中扩增mTSARG3的开放阅读框(ORF),并将PCR产物插入到pGEM-TEasy载体中测序验证。随后,经NotI和Hind III酶切后将目的片段进一步克隆到pcDNA3.1 Hygro(-)真核表达载体中。将经过测序验证的pcDNA3.1 Hygro(-)/mTSARG3表达质粒转染GC-1细胞,通过潮霉素筛选建立mTSARG3稳定转染的GC-1细胞系。RT-PCR和Western b...

• 出版日期2010
• 单位中南大学