摘要

研究目的是获得适用于狭边大叶藓(Rhodobryum ontariense)遗传多样性研究的ISSR-PCR反应标准化程序。通过单因素试验设计,对Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板、引物浓度,以及退火温度、循环次数等影响ISSR扩增的主要因素进行了研究和优化。结果表明,UBC808、UBC811、UBC812、UBC825、UBC826、UBC841、UBC888及UBC891引物适用于该研究;20μL ISSR-PCR最适反应体系包括:6 ng DNA模板、0.4μmol/L引物、2.25 mmol/L Mg2+、0.6 UTaqDNA聚合酶、0.4 mmol/L dNTPs。扩...