香蕉PPO基因的克隆及原核表达

作者:陈娇; 袁德保; 谭琳; 杨昭; 李奕星; 王朝政; 李芬芳; 仇厚援; 陈文学; 金志强
来源:贵州农业科学, 2015, 43(07): 14-18.
DOI:10.3969/j.issn.1001-3601.2015.07.004

摘要

为进一步在蛋白水平上研究香蕉PPO功能及获得抗酶促褐变的香蕉新品种,通过PCR从巴西蕉中扩增出多酚氧化酶基因(PPO)全长序列,并进行进化树分析与SDS-PAGE电泳检测。结果显示:多酚氧化酶基因全长1 767bp,编码588个氨基酸,GenBank登录号为KF900300.1。与其他物种PPO基因的氨基酸序列有很高的结构相似性,并同时具有保守结构域CuA和CuB,香蕉PPO蛋白与菠萝亲缘关系最近。另外,成功构建原核表达载体pQE80L-MaPPO1,并转化E.coli M15,但未表达出目的蛋白,推测可能与MaPPO1中存在导肽有关。

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