云南松SSR-PCR反应体系的建立与优化

作者：张瑞丽; 许玉兰; 王大玮; 吕学辉; 何承忠; 段安安

来源：生物技术通报, 2012, (04): 93-97.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.04.007

• 云南松
• SSR
• 优化
• 正交设计 Pinus yunnanensis SSR Optimization Orthogonal design

为了建立适宜云南松SSR-PCR的反应体系和扩增程序,利用近缘种火炬松的引物,采用正交设计L16(45)对云南松SSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了适于云南松的SSR反应体系。在10μL的反应体系中,模板DNA的用量为30.0 ng,TaqDNA聚合酶的用量为1.0 U,Mg2+的浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.4 mmol/L,引物的浓度为0.2μmol/L。扩增程序为:94℃预变性4 min;94℃变性45 s,48℃退火30 s,72℃延伸30 s,30个循环;72℃延长1...

• 出版日期2012
• 单位北京林业大学; 西南林业大学