摘要
目的检测proNGF(precursor-nerve growth factor)在大鼠缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion)心肌中的表达变化,探讨proNGF在大鼠心肌I/R损伤中的作用。方法采用结扎左冠状动脉前降支建立大鼠I/R损伤模型,雄性SD大鼠随机分为四组。第一组:Sham组10只,只穿线不结扎;第二组:缺血再灌注组10只,结扎左前降支30 min后松开橡胶管再灌注2 h。实验结束后分别取各组心肌组织行TTC及伊文思蓝染色(Evans)双染色测定心肌梗死面积(infarct area,I),心肌危险区面积(risk area,R),心肌总面积(total area,T),并计算各组I/R及I/T比值;行免疫组化及免疫荧光定位观察proNGF、P75、Sortilin在心肌组织各区域中的表达情况;行Western Blot半定量检测上述蛋白在心肌组织中的表达差异。统计学处理:采用SPSS 20.0统计软件,计量资料的实验数据以均数±标准差■表示,多组资料间的比较采用单因素方差分析(one way,ANOVA)及重复测量资料的方差分析(Repeated Measures和Multivariate),组间比较采用LSD,以P<0.05差异有统计学意义。结果①proNGF、P75、Sortilin在大鼠心肌I/R损伤后的表达情况Sham组心肌细胞和血管内皮细胞均未见明显的免疫阳性细胞;缺血再灌注组心肌组织缺血危险区、梗死区免疫阳性细胞增多;WesternBlot结果显示缺血再灌注组心肌组织proNGF、P75、Sortilin表达较Sham组明显上调。②Evans及TTC双染色测定心肌危险区和心肌梗死区面积实验组与Sham组I/R,I/T比值差异均有显著地统计学差异(P<0.05)。结论 proNGF及其受体在再灌注损伤后表达明显增多,推测proNGF可能通过p75NTR及Sortilin参与了大鼠心肌I/R损伤的病理进程。
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