抗人gp130单克隆抗体的制备及其生物学特性分析

作者:苗平; 钱柳; 赵蓉; 余奇文; 张继英; 陈雪华; 陆梅生; 张冬青
来源:中国免疫学杂志, 2011, 27(12): 1119-1122+1128.
DOI:10.3969/j.issn.1000-484X.2011.12.16

摘要

目的:制备小鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体,并分析其生物学特性及初步的免疫学功能。方法:用gp130抗原免疫BALB/c小鼠,经三次免疫获得高效价的ELISA结果后,取小鼠的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经多次亚克隆筛选得到稳定分泌抗gp130单克隆抗体的杂交瘤细胞株。大量扩增杂交瘤细胞,收集细胞上清,随即过亲合层析柱进行纯化,对经纯化的抗人gp130单克隆抗体进行亚型鉴定,用Western blot及间接ELISA、biacore方法分析抗人gp130单克隆抗体的纯度、特异性及亲和力,用FACS术检测抗人gp130单克隆抗体与膜表面富含IL-6受体的U266细胞系的结合率...

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