跨膜型肿瘤坏死因子-α胞内段基序稳定表达细胞株的建立及功能研究

作者：秦娜琳; 尹丙姣; 王妮丹; 朱建华; 庞艳; 姜小丹; 冯玮; 李卓娅

来源：免疫学杂志, 2007, 23(06): 610-613+618.

DOI：10.3969/j.issn.1000-8861.2007.06.006

• 跨膜型肿瘤坏死因子-α胞内段基序
• NF-κB
• 反向信号
• MCF-7细胞

目的建立高表达跨膜型肿瘤坏死因子-α胞内段(TNF-intracellular domain,TNF-ICD)基序的人乳腺癌MCF-7细胞株,为研究TM-TNF-α的反向信号提供工具。方法采用脂质体介入法将含人TNF-ICD的pIRES2-EGFP病毒载体导入MCF-7中,经鉴定、筛选获得能稳定表达TNF-ICD细胞株。采用MTT法检测转染细胞对TNF-α的敏感度,比色法检测NO含量,ELISA方法检测NF-κB的活性。结果TNF-ICD基因转染入MCF-7细胞后表达在细胞膜上,并能提高该细胞NF-κB活性,抵抗TNF-α的杀伤,增加其NO产生;应用NF-κB抑制剂PDTC处理后能恢复该细胞对TNF的敏感性。结论获得稳定表达TNF-ICD的MCF-7细胞株,TNF-ICD可能作为TM-TNF-α细胞内的一段活化基序参与TM-TNF-α的反向信号,并通过活化NF-κB,抵抗可溶性TNF-α介导的细胞毒作用,增加NO的产生。

• 出版日期2007
• 单位华中科技大学同济医学院; 基础医学院