敲低CTCF对5-氟尿嘧啶、顺铂耐药结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制

作者：王蓉荻; 郭旭; 徐孟

来源：山东医药, 2023, 63(01): 42-46.

• 结直肠癌
• 5-氟尿嘧啶
• 顺铂
• 化疗耐药
• 恶性生物学行为
• Hedgehog信号通路

目的 探讨敲低CCCTC结合因子(CTCF)对5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)耐药结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法 体外传代培养CRC耐药细胞株HT29/5-Fu、HT29/DDP，筛选HT29/5-Fu、HT29/DDP细胞半数抑制活性(IC50)时5-Fu或DDP浓度进行后续实验。选择HT29/5-Fu、HT29/DDP细胞，随机分为HT29/5-Fu shCTCF组与HT29/5-Fu shControl组、HT29/DDP shCTCF组与HT29/DDP shControl组，分别转染shCTCF或shControl，采用Western blotting法检测CTCF蛋白表达。取各组转染后细胞，采用MTT法检测细胞存活率，采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力，采用流式细胞术检测细胞凋亡率，采用Western blotting法检测Hedgehog信号通路补缀同源物1(PTCH1)、补缀同源物2(PTCH2)、胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(GLI1)、音猬因子(SHH)蛋白表达。结果 5-Fu对HT29/5-Fu细胞IC50的浓度为(13.0±1.6)mg/L,DDP对HT29/DDP细胞IC50的浓度为(15.2±1.3)mg/L。选择13.0 mg/L 5-Fu、15.0 mg/L DDP进行后续实验。HT29/5-Fu shCTCF组、HT29/DDP shCTCF组CTCF蛋白相对表达量均显著低于其shControl组(P均<0.05)。HT29/5-Fu shCTCF组、HT29/DDP shCTCF组培养24、48、72 h细胞存活率均显著低于其shControl组(P均<0.05)。HT29/5-Fu shCTCF组、HT29/DDP shCTCF组细胞侵袭能力均显著低于其shControl组，细胞凋亡率均显著高于其shControl组(P均<0.05)。HT29/5-Fu shCTCF组和HT29/DDP shCTCF组Hedgehog信号通路PTCH1、PTCH2、GLI1、SHH蛋白相对表达量均显著低于其shControl组(P均<0.05)。结论 敲低CTCF可抑制5-Fu、DDP耐药CRC细胞增殖、侵袭并诱导其凋亡，其机制可能与抑制Hedgehog信号通路有关。

• 出版日期2023
• 单位大连市中心医院