hGPx-1-198Leu真核表达载体的构建与鉴定及在H9C2细胞中的表达

作者：王素琴; 牛小麟; 朱延河; 高登峰; 林琳

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2013, (02): 152-156.

• GPx-1基因
• Pro198Leu多态
• 真核表达载体
• 转染
• H9C2细胞
• 硒 GPx-1 gene
• Pro198Leu polymorphism
• eukaryotic expression vector
• transfection
• H9C2 cell
• selenium

目的构建含有人GPx-1基因Pro198Leu多态的真核表达载体,为深入研究GPx-1基因Pro198Leu多态在相关疾病中的作用与机制提供依据。方法采用全基因合成的方法合成含多态位点的人GPx-1基因cDNA片段,同时在基因5′端和3′端分别引入BamHⅠ和NotⅠ酶切位点,通过限制性内切酶酶切目的片段和真核表达载体pEGFPN3,再用T4DNA连接酶将含有目的基因的片段定向插入到载体pEGFP-N3真核人巨细胞病毒启动子下游。连接产物转化至DH5α中。挑取克隆、提取质粒进行鉴定。将hGPx-1-198Leu真核表达载体转染HEK293细胞,观察转染效率,并采用RT-PCR检测转染重组载体后...

• 出版日期2013-11-19
• 单位西安交通大学