奶山羊LXRα基因shRNA序列的筛选及腺病毒载体的构建与鉴定

作者：钟瑜; 罗军; 王维; 胡仕良; 李君; 孙雨婷; 郝娟; 石恒波

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, (11): 41-47+52.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2011.11.003

• 肝脏X受体α
• RNA干扰
• 腺病毒载体
• 奶山羊 liver X receptor α
• RNA interference
• adenovirus vector
• dairy goat

【目的】构建针对奶山羊肝脏X受体α(Liver X receptorα,LXRα)基因的干扰腺病毒载体。【方法】根据奶山羊LXRα基因CDS区域设计小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),分别构建pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA及pDsRed1/C1-LXRα载体,共转染HEK 293细胞,48h后观察其荧光蛋白表达量,筛选出具有明显干扰效应的shRNA。将具有明显干扰效应的shRNA载体与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST在LR ClonaseTMⅡ重组酶的作用下进行重组,经氨苄青霉素及氯霉素抗性筛选后获得重组腺病毒载体。将构建好的重组腺病毒载体经Pac...

• 出版日期2011
• 单位西北农林科技大学