气单胞菌aerA和hlyA两基因在溺死诊断中的应用

作者:肖成; 朱晓琳; 徐曲毅; 韩雅莉; 李越; 余仲昊; 李欢; 彭帆; 刘向东; 刘超*
来源:刑事技术, 2021, 46(02): 111-118.
DOI:10.16467/j.1008-3650.2020.0003

摘要

目的建立溺死尸体脏器气单胞菌气溶素(aer A)和溶血素(hly A)两基因的PCR-CE检测方法,验证该方法的特异性和灵敏度,并探讨其在溺死诊断中的应用价值。方法设计气单胞菌(Aeromonas)特异性引物aer-A1和hlyA-1,构建PCR-CE方法;扩增52种标准株DNA;确定最低DNA检测浓度;检测16只实验猪和40例真实案件尸体组织样本,分别计算两对引物总阳性率。结果引物aerA-1可特异性扩增杀鲑气单胞菌和温和气单胞菌,产物片段为180bp,灵敏度分别为0.034、0.92ng;引物hlyA-1可特异性扩增杀鲑气单胞菌和嗜水气单胞菌,产物片段为150bp,灵敏度分别为0.94、0.034ng。利用aerA-1检测溺死实验猪和真实案件尸体组织样本,溺死阳性率分别为70.00%、78.38%;利用hlyA-1检测溺死实验猪和真实案件尸体组织样本,溺死阳性率分别为80.00%、83.78%。结论基于气单胞菌aer A基因和hly A基因建立的PCR-CE检测方法进行溺死诊断,快速灵敏,特异性好,有良好的应用前景。

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