适用于黄瓜叶片、根系和果实总蛋白的双向电泳体系的建立

作者:刘晓林; 杨学勇; 余宏军; 蒋卫杰; 赵文超; 王燕; 张晓孟
来源:基因组学与应用生物学, 2016, 35(03): 721-727.
DOI:10.13417/j.gab.035.000721

摘要

通过对上样量、分离胶浓度、等电聚焦参数三方面条件的优化,采用三氯乙酸/丙酮法提取黄瓜叶片总蛋白,初步建立了适用于黄瓜叶片总蛋白的双向电泳体系。进一步发现此优化条件结合蛋白的酚提取法,也适用于黄瓜根系和果实总蛋白的双向电泳。具体优化条件为:选用24 cm pH 47线性固相化pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)胶条,上样量为800μg,分离胶浓度为12.5%,按聚焦程序Ⅱ聚焦,采用胶体考马斯亮蓝方法染色。采用该优化的体系可以同时进行黄瓜叶片、根系和果实总蛋白的双向电泳,并获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。。

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