大鼠FⅦEGF1区与乙肝病毒包膜S区融合基因的构建及表达

作者：刘琳; 胡豫

来源：临床血液学杂志(输血与检验版), 2012, 25(12): 833-837.

DOI：10.13201/j.issn.1004-2806-b.2012.06.026

• 凝血因子Ⅶ
• 乙肝病毒L粒子

目的:构建原核表达载体PQE30-EGF1以及PQE30-7L,诱导表达融合大鼠凝血因子ⅦEGF1蛋白及融合蛋白7L。结果:从已构建的pPIC9K-7L质粒中扩增出目的片段EGF1和7L,通过基因工程的方法将其与PQE30连接,构建PQE30-EGF1和PQE30-7L两个重组质粒,并分别转化到BL21菌株中。用IPTG诱导表达EGF1蛋白和7L融合蛋白。采用亲和层析方法Ni柱纯化融合蛋白。结果:PQE30-EGF1和PQE30-7L两个重组质粒构建成功。EGF1蛋白和7L融合蛋白在转化的大肠杆菌中获得高效表达。结论:大鼠凝血因子Ⅶ上EGF1区与乙肝病毒包膜蛋白重组后可分泌出高效表达的融合蛋白,为进一步验证蛋白的生物学活性及对照真核表达载体表达的融合蛋白活性提供了对照和实验依据,同时为分子靶向抗栓治疗和肿瘤治疗潜在的新靶点的研究奠定基础。

• 出版日期2012
• 单位华中科技大学同济医学院附属协和医院