可溶性尿激酶受体的表达、纯化和结晶

作者：袁彩; 淮清; 卞传兵; 黄明东

来源：生物化学与生物物理进展, 2006, (03): 277-281.

• 可溶性尿激酶受体
• 纯化
• 复合物结晶 soluble human urokinase receptor
• S2 cells
• purification
• crystallization

克隆尿激酶受体可溶区域(suPAR)到果蝇胚胎细胞分泌表达载体pMT/Bip/v5-his,重组质粒与pCoHygro共转染果蝇S2细胞,筛选多拷贝稳定表达细胞系suPARS2.suPAR表达蛋白经尿激酶N端片段亲和柱、ResourceQ阴离子交换柱两步纯化后,得到高纯度的、稳定的suPAR单体.纯化后的蛋白质,与其抗体ATN615及尿激酶N端片段结构域等摩尔混合,浓缩至10g/L,以透析法进行该三元复合物晶体生长,获得衍射分辨率为1.9#的蛋白质晶体.

• 出版日期2006
• 单位中国科学院研究生院; 中国科学院福建物质结构研究所; Beth Israel Deaconess Medical Center; 结构化学国家重点实验室; Harvard Medical School; Harvard medical school; harvard medical school