摘要

目的基于正交试验设计,优化款冬花(Tussilago farfara L.)的ISSR反应体系,并分析各因素及因素间二阶交互作用对整个体系的影响。方法采用含交互作用的正交表L27(313)进行4因素3水平正交试验,并采用方差法和极差法对实验结果进行分析。结果建立了稳定性高、重复性好的款冬花反向简单重复序列区间多态性分子标记(ISSR)反应体系,其中,Mg2+对款冬花反向简单重复序列区间多态性分子标记体系影响最显著(P<0.01),其次是Taq酶(P<0.05)、dNTPs(P<0.05);二阶交互作用中,Mg2+与dNTPs的交互作用对体系影响最大(P<0.1)。结论在ISSR反应体系的优化过程中,应要特别注意考察体系中各因素及因素间二阶交互作用对整个体系的影响。