新生大鼠施万细胞体外培养的实验研究

作者：周敏; 胡鸣; 何松明; 黄国涛; 陈乾; 洪莉

来源：中国医药导报, 2018, 15(13): 14-181.

• 施万细胞
• 原代培养
• 双酶消化法
• 单酶消化法

目的通过比较两种不同的新生大鼠施万细胞(SCs)原代培养的方法 (双酶消化法与单酶消化法),探索出一种细胞纯度更高、获取时间更短的SCs细胞培养方法。方法取45 d SD乳鼠双侧坐骨神经,分别采用单酶和双酶消化法,联合运用半植块法、差速消化法、差速贴壁法以及抗有丝分裂法原代培养纯化SCs。培养SCs 48 h和6 d后倒置显微镜观察两组细胞形态,7 d后分别进行SCs消化与传代,细胞计数板计数两组的SCs总数,传代48 h后用免疫荧光标记S-100蛋白对两组细胞进行鉴定,CCK-8测定细胞生长曲线。结果用等量的神经组织,与单酶消化法比较,双酶消化法培养的SCs所获得SCs数目远高于单酶消化法所获得细胞数目(2倍以上)。免疫荧光结果显示,双酶消化法纯度[(95.29±1.71)%]高于单酶消化法[(72.41±2.16)%](P<0.05),两种方法 P3代细胞生长曲线差异无统计学意义(P>0.05)。结论在短时间内,用双酶消化法联合半植块法、差速消化法、差速贴壁法以及抗有丝分裂法可获得足量和高纯度的SCs。

• 出版日期2018
• 单位武汉大学人民医院