胰酶消化后新生鼠成肌细胞生长方式与规律以及模拟转基因电穿刺激对冻存和复苏细胞的损害

作者：王炜; 石明; 唐孝达; 王佳

来源：中国临床康复, 2006, 10(09): 46-47.

DOI：10.3321/j.issn:1673-8225.2006.09.019

• 细胞
• 培养的
• 大鼠

目的:采用原代培养技术进行大鼠原代细胞的培养与增殖,并模拟基因转染中的电穿刺激,探讨大鼠成肌细胞在基因转染技术中可能的应用前景。方法:实验于2000-04/10在四川大学华西医院病理实验室完成。①选取SD新生鼠10只,消毒后切开皮肤,分离大腿肌肉,高浓度磷酸盐缓冲液浸泡,5min后剪碎组织块至1mm3以下,加入胰酶使用液,37℃水浴消化,胎牛血清终止消化过程,弃上清。再加入生长培养基重悬细胞,置于CO2孵箱中进行接种。②弃去培养基,重新加入等量生长培养基,3～5d更换1次。显微镜下细胞若出现间隙或变圆即中止消化。细胞计数后按所需密度接种于培养瓶,1∶2或1∶3传代。③细胞的冻存与复苏:冻存液的...

• 出版日期2006
• 单位四川大学华西医院; 东莞市人民医院; 上海市第一人民医院