适用于棉花荧光原位杂交的DNA纤维高效制备技术

作者：彭仁海; 宋国立; 刘方; 黎绍惠; 王春英; 张香娣; 王玉红; 王坤波

来源：作物学报, 2009, (03): 412-417.

• 棉花
• 荧光原位杂交
• DNA纤维
• 高效制备 Cotton
• FISH
• DNA fibers
• Efficient preparation

棉花富含酚类和多糖等高分子次生化合物,细胞质浓厚,且染色体形态小、数目多、制片困难,至今还未见棉花DNA纤维制备方面的报道。本研究用"刀切引流法",在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中,用锋利的刀片切割发育一周的棉花黄化子叶以释放棉花细胞核,所得细胞核干净完整杂质少,不需要研磨和巯基乙醇等处理,方便快捷无毒害,成功率达到100%。细胞核在室温下经温和碱裂解去除染色质上的蛋白质后,以前端导引裂解液铺展载玻片,即"引流法"拉伸制备DNA纤维,避免了液体表面张力的影响,消除了因载玻片推抹用力不均而导致的DNA纤维堆积和断裂,所制备的DNA纤维平直完整、伸展程度均匀、背景...

• 出版日期2009
• 单位安阳工学院; 中国农业科学院棉花研究所