土壤镰孢菌Real-Time QPCR定量方法的建立及应用

作者：魏巍; 许艳丽; 刘金波; 李春杰; 韩晓增; 李文滨; ***

来源：大豆科学, 2010, (04): 655-658+662.

• 镰孢菌
• 实时荧光定量PCR
• 绝对定量 Fusarium spp.
• Real-Time QPCR
• Absolute quantitation

基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR(Real-Time QPCR)反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥(NF)、化肥(NP)以及化肥配施有机肥(NPM)等3种施肥措施下大豆田土壤镰孢菌DNA含量。结果表明:引物TS和TR对镰孢菌属真菌有较好的特异性;Real-Time QPCR反应的扩增曲线中各梯度浓度标准品的循环阈值(Ct值)间隔均匀,熔点曲线无杂峰,标准曲线的相关系数R2=0.993,斜率为-0.2927;在大豆生育时期的苗期,NF、NP及NPM措施下土壤镰孢菌总DNA每克干土中含量分别为18...

• 出版日期2010
• 单位中国科学院大学; 中国科学院东北地理与农业生态研究所