H5亚型和N6亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

作者：何莹; 谢芝勋; 罗思思; 李孟; 谢志勤; 谢丽基; 黄莉; 邓显文; 黄娇玲; 张艳芳; 曾婷婷

来源：动物医学进展, 2017, 38(03): 1-4.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2017.03.001

• 禽流感病毒
• H5亚型
• N6亚型
• 二重逆转录-聚合酶链反应

为了建立一种快速、简便的H5亚型、N6亚型禽流感病毒(AIV)的检测方法,根据GenBank中H5亚型、N6亚型AIV的HA和NA基因保守序列,分别设计了2对特异性引物,通过优化条件,建立了H5亚型和N6亚型AIV二重RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,该方法对H5N6亚型AIV特异性扩增出418bp和251bp目的片段,对H5Ny(y≠6)亚型AIV扩增出418bp目的片段,对HxN6(x≠5)亚型AIV扩增出251bp目的片段,对其他亚型和常见的禽病病原体均未扩增出目的片段;敏感性结果显示,该方法对H5亚型和N6亚型最低检测限为1.59×10-5ng/μL。本研究建立的H5亚型和N6亚型AIV检测方法,具有特异性强,灵敏度高的特点,为H5亚型和N6亚型AIV临床检测以及防控提供了有效方法。

• 出版日期2017
• 单位广西壮族自治区兽医研究所; 广西大学