口蹄疫病毒受体羊源整联蛋白β6亚基配体结合域的原核表达、纯化及鉴定

作者：薛霜; 独军政; 高闪电; 常惠芸

来源：华北农学报, 2009, (05): 55-58.

• 口蹄疫病毒
• 受体
• 整联蛋白β6亚基
• 配体结合域
• 原核表达 FMDV
• Receptor
• Integrin β6 subunit
• Ligand-binding domain
• Prokaryotic expression

利用原核细胞表达羊口蹄疫病毒(FMDV)受体整联蛋白β6亚基的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白。以含有羊整联蛋白β6亚基全长cDNA的质粒为模板,PCR扩增得到β6LBD基因片段,经酶切消化处理后与同样酶切处理的原核表达载体pPROEXTMHTb相连,构建原核表达质粒pPRO/β6LBD,测序确认读码框正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),IPTG诱导表达重组羊β6LBD融合蛋白。SDS-PAGE鉴定重组蛋白的表达并利用镍离子亲和树脂对其纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot方法分析鉴定表达产物。成功构建了pPRO/β6LBD原核表达载体,实现了羊...

• 出版日期2009
• 单位农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所