单核细胞增生李斯特菌prfA基因重组菌的构建及其生物学特性研究

作者：丁波; 孟庆玲; 乔军; 陈创夫; 才学鹏; 张再超; 杨丽红

来源：中国预防兽医学报, 2012, (09): 677-681.

• 单核细胞增生李斯特菌
• 同源重组
• 减毒重组菌
• prfA基因 Listeria monocytogenes
• homologous recombination
• a recombinant attenuated bacteria
• prfA gene

为制备单核细胞增生李斯特菌(LM)减毒的prfA基因重组菌,本研究通过构建重组质粒pKSV7-ΔprfA-gfp,电转化至LM TA感受态细胞中,将绿色荧光蛋白基因gfp插入LM的prfA基因第25 bp～93 bp之间,在42℃和10μg/mL氯霉素的双重选择压力下,筛选LM重组菌(rLM-ΔprfA-gfp),并对其生物学特性进行鉴定。试验结果表明,重组菌与亲本菌相比具有相似的体外生长特性,溶血素基因(hly)mRNA的转录水平降低;对小鼠的毒力显著减弱,其LD50由105.53升高到109.79,对肝、脾、肾的损伤不明显;免疫保护力试验显示重组菌与LM TA灭活疫苗的保护率分别为90%和...

• 出版日期2012
• 单位中国农业科学院兰州兽医研究所; 石河子大学