CRISPR/Cas9编辑雪兔Corin基因载体的构建

作者：王海禄; 李杰; 尹俊^*

来源：生物技术, 2019, 29(02): 103-204.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.02.0018

• Corin
• CRISPR/Cas9
• 基因敲除
• 雪兔
• 载体构建

[目的]通过CRISPR/Cas9系统构建雪兔Corin基因编辑载体。[方法]通过在线CRISPR设计工具设计2个靶点,退火制备sgRNA双链,用BbsⅠ酶得到线性p X330载体后,经重组酶连接得到重组质粒。将重组质粒转化到DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析。[结果]通过特异性扩增以及测序结果表明sgRNA准确地连入载体,插入序列无突变,与预期序列高度一致,重组子阳性率为100%。[结论]成功构建了雪兔Corin基因敲除载体,为进一步利用CRISPR/Cas9技术进行雪兔Corin基因编辑工作提供了研究基础。

• 出版日期2019
• 单位生命科学学院; 内蒙古农业大学