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摘要
为了建立一种灵敏快速检测禽脑脊髓炎病毒(AEV)的Luminex xTAG技术方法，本试验针对AEV高度保守的VP1基因设计了1对特异性引物，在上游引物的5′端通过Spacer18间隔添加Tag序列，下游引物的5′端标记生物素，进行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增，构建质粒标准品，通过优化反应体系建立Luminex xTAG检测方法。用所建立的Luminex xTAG方法进行特异性、敏感性和重复性试验，并与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法同时对45份脑组织临床样品进行检测。结果显示，所建立AEV Luminex xTAG检测方法与传染性法氏囊病毒、禽传染性贫血病病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、传染性喉气管炎病毒、禽白血病病毒、马立克病毒和禽传染性支气管炎病毒无交叉反应；灵敏度可达1×102 copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于4.0%;对45份临床样品的Luminex xTAG检测结果与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测结果一致。结果表明，所建立的AEV Luminex xTAG检测方法特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好，可用于AEV的快速检测。
- 出版日期2023
- 单位广东海洋大学; 广东省实验动物监测所
