单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株的筛选

作者：马瑜丹; 朱欣娜; 龙飞; 史贤明

来源：中国食品学报, 2009, (02): 11-17.

DOI：10.16429/j.1009-7848.2009.02.029

• 单核细胞增生李斯特菌
• Tn917
• 菌膜 Listeria monocytogenes Tn917 Biofilm

通过对功能和调控基因的研究,探讨单核细胞增生李斯特菌菌膜的形成机制,建立防治该细菌污染食品的方法。使用电转化的方法,将携带转座子Tn917的质粒pTV1-OK转化到单核细胞增生李斯特菌中,诱导转座,获得1 880个突变株,加上前期构建的突变株,使突变库增加到2 200株。使用96孔细胞培养板对随机挑选的1 000余株突变株进行菌膜培养,结晶紫染色后测OD595值。以此值作为菌膜形成量的筛选依据,最终挑选出菌膜形成能力变小的突变株8株,目标突变获得率约8‰。对筛选的菌膜形成量变小的突变株进行荧光显微观察,证实该8株突变株菌膜形成能力弱于野生菌株。通过PCR验证,这8株突变株的基因组中插入了Tn9...

• 出版日期2009
• 单位上海交通大学