口蹄疫病毒2C′3AB基因重组杆状病毒的构建及其表达

作者:张小丽; 卢曾军; 田美娜; 孙普; 曹轶梅; 付元芳; 马小军; 刘在新; 谢庆阁
来源:中国兽医科学, 2008, (06): 483-488.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2008.06.006

摘要

将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C′3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C′3AB。将重组穿梭质粒pMel-2C′3AB与杆状病毒骨架共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选及PCR鉴定,构建了含有目的基因的重组杆状病毒。用该病毒感染High Five细胞,细胞裂解液的SDS-PAGE电泳结果显示,出现一约为43ku的蛋白带,与预期大小一致;Western-blotting结果表明,该表达产物能被FMDV阳性血清及2C′3AB单克隆抗体识别;间接ELISA结果显示,表达的目的蛋...

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