大鼠OSP-1启动子克隆与表达检测

作者：于今非; 李明鸿; 谢琴; 刘庆友; 石德顺

来源：安徽农业科学, 2010, (24): 13190-13192+13202.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.24.017

• OSP-1启动子
• 水牛
• 卵巢特异表达 OSP-1 promoter
• Buffalo
• Ovarian-specific expression

[目的]克隆大鼠卵巢特异性启动子(OSP-1)片段,并在细胞水平检测该启动子调控标记基因的组织特异性表达。[方法]参考已知大鼠OSP-1序列设计特异性引物,PCR扩增大鼠OSP-1启动子片段并与已公布的大鼠OSP-1序列进行比较。将OSP-1启动子定向克隆到去除CMV的pEGFP-N1载体,构建真核表达载体pOSP-1-EGFP-N1;重组质粒在脂质体LipofectamineTM2000介导下,分别转染水牛的颗粒细胞、乳腺上皮细胞和胎儿成纤维细胞,并于转染后12,24和48h在荧光显微镜下观察EGFP表达情况。[结果]OSP-1启动子扩增片段长480bp,与已公布的大鼠OSP-1序列的相似性...

• 出版日期2010
• 单位广西大学