低浓度Ⅱ、Ⅳ型胶原酶联合消化法分离幼年SD大鼠睾丸间质细胞

作者：李阳; 王宇; 程康; 刘春

来源：中华临床医师杂志(电子版), 2017, 11(14): 2033-2037.

• 睾丸间质细胞
• 分离
• 纯化
• 鉴定
• 大鼠

目的探索一种简单有效的大鼠睾丸间质细胞的分离、纯化方法。方法采用0.1%Ⅱ、Ⅳ型胶原酶混合液消化组织块分离睾丸间质细胞,用差速贴壁法纯化间质细胞,用3β-HSD免疫荧光染色鉴定间质细胞,同时用酶联法测定间质细胞分泌睾酮的活性。结果 (1)采用0.1%Ⅱ、Ⅳ型胶原酶联合消化法分离睾丸间质细胞的最佳酶解时间为1 h左右。(2)利用差速贴壁纯化睾丸间质细胞的最佳贴壁时间为12 h。(3)培养24 h后,3β-HSD免疫荧光染色鉴定睾丸间质细胞纯度达(98.1±1.5)%,盼蓝染色鉴定睾丸间质细胞存活率达(97.3±1.6)%。(4)贴壁后培养12 h,睾丸间质细胞即达分泌高峰。结论本实验建立了一种简便易行、稳定可靠的原代睾丸间质细胞分离纯化方法,通过此法能够获得足够多具高活性的高纯度睾丸间质细胞,并且睾丸间质细胞增殖能力较强。

• 出版日期2017
• 单位山西医科大学第一医院