山羊骨骼肌卫星细胞系分离、培养及其成肌诱导分化研究

作者:李伟; 郑蒙蒙; 邱峰龙; 朱才业; 韦光辉; **; 李碧春
来源:扬州大学学报(农业与生命科学版), 2013, (01): 12-17.
DOI:10.16872/j.cnki.1671-4652.2013.01.004

摘要

采用外科手术方法从山羊四肢肌肉或背最长肌获取3mm×3mm肌肉束,置于1mg.mL-1 IV胶原酶中,室温消化30min,分散肌丝,在体视显微镜下分离肌丝;再用0.25%胰酶-EDTA于37℃下消化10min,以释放出骨骼肌卫星细胞(SSC)和其他细胞。连续5代在增殖培养体系(80%DMEM/F12+10%胎牛血清+10%马血清)中采用差速贴壁方法,收集接种后20min的贴壁细胞,对纯化的SSC采用免疫荧光方法检测SSC特异标志蛋白Pax-7,结果表明:(92.5±3.4)%细胞表达Pax-7,(93.0±1.8)%细胞表达MyoD,说明90%以上细胞为SSC。将纯化的SSC细胞分别在诱导培养...

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