微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库的构建

作者:李文卉; 罗建勋; 殷宏; 高金亮; 关贵全; 刘志杰; 党志胜; 马米玲; 刘爱红; 任巧云
来源:中国兽医科技, 2005, (12): 994-996.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2005.12.015

摘要

为了研究微小牛蜱功能性抗原基因,从微小牛蜱(Boophilus microplus)幼蜱中提取总RNA并分离纯化mRNA。采用Oligo(dT)引物合成双链cDNA,在其两端加EcoRⅠ、HindⅢ定向接头,用Mini Column Fractionation凝胶过滤柱纯化后定向克隆到λSCREEN载体。经体外包装,成功构建了我国微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库,铺板测定原始库容量为4.5×105PFU,扩增后的滴度为7.2×1010PFU/mL。

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