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摘要
目的探讨多能干细胞核心调控基因Nanog在原始生殖细胞(PGCs)向生殖母细胞方向分化过程中的作用。方法取11.0d胎鼠PGCs,按胚胎干细胞(ES)培养标准进行体外胚胎生殖细胞(EG细胞)培养。采用脂质体方法将Nanog靶向特异性小干扰RNA(siRNA)转染入EG细胞。RT-PCR、免疫荧光法检测siRNA的沉默效率;在倒置相差显微镜下进行体外克隆计数,检测EG细胞增殖未分化状态;TUNEL法和透射电镜检测EG细胞凋亡情况;半定量RT-PCR检测与生殖母细胞减数分裂相关的标志基因(Mvh、Stra8、Sycp3)的mRNA表达。结果转染siRNA后48h EG细胞Nanog mRNA和蛋白...
- 出版日期2012
- 单位重庆医科大学
