创伤弧菌天然溶血素的制备及其活性研究

作者：王亚茹; 凤梓涵; 李世青; 徐健皓; 袁兵; 王景林; 刘丽; 袁媛^*

来源：昆明理工大学学报(自然科学版), 2023, 48(03): 136-144.

DOI：10.16112/j.cnki.53-1223/n.2023.03.252

• VVH
• 天然蛋白纯化
• 溶血活性
• 胆固醇
• 雌二醇

创伤弧菌溶血素(V.Vulnificus Hemolysin, VVH)是创伤弧菌重要的致病因子之一，但目前国内外重组表达的VVH多为包涵体形式.本研究建立了创伤弧菌培养上清中分泌型溶血素的纯化制备方法，并评价了胆固醇及雌二醇对天然VVH溶血活性的影响，为进一步深入研究VVH蛋白的生物学功能及致病机制奠定了基础.研究采用硫酸铵沉淀法结合脱盐柱、阴离子层析及疏水相互作用纯化制备出天然VVH,用溶血试验验证了蛋白活性，评价了胆固醇、雌二醇对创伤弧菌YJ016培养上清以及天然VVH溶血活性的影响.结果显示：从创伤弧菌培养上清中纯化制备的天然VVH纯度较高，其具有良好的溶血活性(2μg/HU),100μg/mL的胆固醇或雌二醇均能有效抑制VVH的溶血活性.本研究成功建立了制备天然VVH的有效方法，为创伤弧菌重症感染的致病机制、防控与治疗研究奠定了基础，同时对其他致病弧菌溶血素的制备也具有借鉴意义.

• 出版日期2023
• 单位病原微生物生物安全国家重点实验室; 昆明理工大学