定量检测PD-1单克隆抗体ELISA法的建立

作者：王筱婧; 刘运龙; 王东兴; 祝倩; 程远国

来源：免疫学杂志, 2016, 32(08): 712-724.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20160139

• PD-1单克隆抗体
• ELISA
• 定量检测
• 药代动力学

目的建立一种高特异、高灵敏、新型的定量检测食蟹猴血清中PD-1单克隆抗体质量浓度的ELISA方法。方法用重组人PD-1作为抗原包被到96孔板上,加入系列浓度标准品(PD-1单克隆抗体)和稀释的食蟹猴血清,再加入稀释的猴血清吸附的羊抗人Ig G-HRP(二抗),二抗与结合到抗原上的PD-1单克隆抗体特异性结合,加入底物显色剂,用硫酸终止,在450 nm下读数。结果在400.625 ng/ml范围内,PD-1单克隆抗体质量浓度的对数值与吸光值呈S形曲线,方法灵敏度为0.625 ng/ml,TNF-α、r HSA、PEG-GH和受试品PD-1单克隆抗体均无交叉反应,方法的回收率为94.5%98.0%,板内精密度波动在-4.1%-0.1%,板间精密度波动在-5.0%-1.0%。结论本方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则的要求,可用于食蟹猴体内PD-1单克隆抗体的定量检测。

• 出版日期2016
• 单位中国药学会; 北京军区总医院; 军事医学科学院