米曲霉葡聚糖酶基因(AoEGLAI)在毕赤酵母中的表达研究及其酶学特性分析

作者:何永梅; 王波; 李大伟; 田永生; 彭日荷; 姚泉洪
来源:上海农业学报, 2016, 32(03): 18-23.
DOI:10.15955/j.issn1000-3924.2016.03.04

摘要

采用PTDS方法人工合成米曲霉葡聚糖酶基因(AoEGLAI),通过电击将其转化到毕赤酵母中表达,并采用DNS法对重组酶的酶学性质进行分析。结果表明:该酶耐酸但不耐热,最适反应温度为50℃,最适pH为3.0,在30—45℃和pH4—8时内切葡聚糖酶可保持90%以上酶活力,在底物CMC存在时其热稳定性有一定的提高。10 mmol/L的金属离子Cu2+、Ca2+、Zn+、Gr3+、Fe2+和Fe3+对酶有激活作用,Mn2+对酶则起抑制作用。该酶对胰蛋白酶有一定的抗性,对胃蛋白酶抗性相对较差。

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