Sox2-R_9-EGFP融合蛋白的表达及穿膜能力鉴定

作者：殷慧群; 张运海; 刘亚; 曹鸿国; 孙雪萍; 章孝荣

来源：生物医学工程研究, 2011, (03): 143-149.

DOI：10.19529/j.cnki.1672-6278.2011.03.003

• Sox2基因
• 原核表达
• 细胞穿膜肽
• 融合蛋白 Sox2 gene
• Prokaryotic expression
• Cell penetrating peptide
• Fusion protein

构建、表达、纯化、鉴定Sox2-R9-EGFP融合蛋白,验证其在体外培养的成纤维细胞中的转导活性。以胎猪原始生殖嵴为材料提取总RNA,反转录成cDNA第一链,设计带9聚精氨酸(R9)的特定引物,从cDNA中扩增出猪Sox2基因,克隆到pET-28a-EGFP载体中,经酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,Ni2 柱亲和层析纯化和SDS-PAGE检测表达产物后,将Sox2-R9-EGFP蛋白作用于体外培养的猪胎儿成纤维细胞中以观察其转导活性。成功构建Sox2-R9-EGFP融合蛋白原核表达载体,纯化后蛋白经SDS-PAGE检测证实融合蛋白片段大小正确,加到培养的猪胎...

• 出版日期2011
• 单位安徽农业大学