忧遁草中黄酮苷的分离纯化以及对上皮性卵巢癌抗肿瘤作用的研究

作者：隋红梅; 贺凤喜; 李爱华^*; 李爱峰^*; 王丽; 路焕喜

来源：国际医药卫生导报, 2022, 28(13): 1784-1789.

• 忧遁草
• 上皮性卵巢癌
• Bcl-2
• Beclin-1
• 细胞凋亡
• 自噬

目的对忧遁草中的黄酮苷成分进行分离与纯化, 研究其对上皮性卵巢癌的抗肿瘤作用, 为开发其药用价值提供理论依据。方法研究时间:2019年10月至2022年3月。通过大孔吸附树脂结合半制备型高效液相色谱对忧遁草中的黄酮苷进行分离纯化, 核磁共振波谱鉴定化合物的结构;采用CCK-8(cell counting kit-8)法测定忧遁草黄酮苷提取物对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3、A2780细胞活性的影响, 流式细胞学技术检测细胞凋亡情况;采用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术检测忧遁草黄酮苷提取物对上皮性卵巢癌细胞中Beclin-1、Bcl-2 mRNA表达的影响;采用蛋白印迹(Western blot)技术检测其对上皮性卵巢癌细胞中Beclin-1、Bcl-2蛋白表达的影响。使用统计软件SPSS 22.0、GraphPad Prism对实验结果进行统计学分析, 单因素方差分析进行细胞半抑制浓度(IC50)值的测定, 采用t检验。结果自忧遁草中分离纯化得到3种黄酮苷化合物, 分别为肥皂草苷、夏佛塔苷和牡荆苷;CCK-8实验结果显示, 牡荆苷对上皮性卵巢癌细胞具有明显增殖抑制作用(P<0.05), 对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3、A2780的半抑制浓度IC50值分别为33.777 μg/μl、34.114 μg/μl、31.968 μg/μl。荧光定量PCR检测结果表明, 和空白组相比, 经牡荆苷处理后, 上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR 3组Beclin-1 mRNA相对表达量增加, Bcl-2 mRNA相对表达量降低, 差异均有统计学意义(均P<0.01)。以上皮性卵巢癌细胞SKOV3为研究对象, 细胞凋亡检测结果显示, 随着牡荆苷浓度的增加, 其对上皮性卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制作用越显著(P<0.01);Western bolt结果显示, 经牡荆苷处理后, 上皮性卵巢癌细胞SKOV3中Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.01), Bcl-2蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论牡荆苷可以抑制上皮性卵巢癌细胞的增殖, 并诱导其凋亡, 具有明显的抗肿瘤作用, 可能是通过调节Bcl-2与Beclin-1的交互作用发挥抗癌活性, 控制肿瘤细胞自噬水平, 促进自噬基因依赖性细胞死亡。

• 出版日期2022
• 单位聊城市人民医院; 聊城大学; 化学化工学院