下调膜联蛋白A2基因转录对肝癌细胞生物学行为的影响

作者:张海健; 姚敏; 钱琦; 时运; 李景源; 陈心; 王司晔; 姚登福
来源:中华肝脏病杂志, 2014, 22(8).
DOI:10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2014.08.014

摘要

目的 观察下调膜联蛋白A2 (annxin A2,ANXA2)表达对肝癌(HCC)细胞生物学行为的影响. 方法 以定量PCR分析不同肝癌细胞ANXA2 mRNA转录水平,以Western blot 分析ANXA2表达;以免疫荧光检测ANXA2在细胞内表达和分布;以碘化丙啶染色和流式细胞术分析细胞周期;以CCK-8试剂盒分析细胞增殖潜能;以transwell实验分析其侵袭潜能;以创伤愈合试验分析其迁移潜能;以裸鼠移植瘤模型分析其致瘤潜能.两样本均数比较用t检验,率的比较用x2检验,等级资料比较用秩和检验,多样本均数的两两比较采用q检验,组间差异用单因素方差分析. 结果 高侵袭潜能MHCC97-H细胞ANXA2表达明显高于HepG2、SMMC-7721和SMMC-7402和L02细胞;特异性shRNA沉默ANXA2效率在80%以上;免疫荧光显示ANXA2定位于细胞膜和细胞质,胞核少见;下调ANXA2表达明显下调HCC细胞S期比例(q=8.001,P=0.002),抑制细胞增殖(q=17.140,P<0.01)、迁移潜能(q=12.808,P<0.01)和侵袭潜能(q=9.069,P=0.002);裸鼠移植瘤模型显示干扰组瘤重下降(q=11.968, P<0.01),瘤体中ANXA2表达下调(Z=2.530,P=0.011).结论 下调ANXA2基因转录显著影响肝癌细胞的生物学行为,可望成为肝癌分子治疗的潜在靶目标.

全文