熟地黄通过抑制自噬和铁死亡改善缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤

作者：李赛菲; 袁培培; 魏亚新; 高丽媛; 李潘营; 阮元; 陈祎; 傅阳; 郑晓珂; 冯卫生^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2024, 30(08): 26-33.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231317

• 熟地黄
• 缺血性脑卒中
• 铁死亡
• 自噬

目的：探讨熟地黄对缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤的影响，并探究其作用机制。方法：将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、熟地黄低剂量组(3.5 g·kg-1)、熟地黄高剂量组(7 g·kg-1)和尼莫地平组(0.01 g·kg-1)。参照改良线栓法制备大鼠脑中动脉闭塞(MCAO)模型，采用Zea-Longa5评分法进行神经功能评分，2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠脑梗死体积，苏木素-伊红(HE)染色和尼氏染色观察脑组织形态结构及损伤情况，同时检测血清乳酸脱氢酶(LDH)活力和氧化应激相关指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、丙二醛(MDA)及脑组织中铁含量变化情况；为进一步探究熟地黄干预缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤的可能机制，采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测缺血侧脑组织中自噬相关蛋白：自噬效应蛋白(Beclin-1)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3B)、泛素结合蛋白p62(p62)，铁死亡相关蛋白：转铁蛋白(TF)、转铁蛋白受体1(TFR1)、铁蛋白重链1(FTH1)、铁转运蛋白1(FPN1)和神经功能损伤相关蛋白：脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)的表达水平。结果：与假手术组比较，模型组大鼠神经功能评分升高，脑梗死体积显著升高，大脑皮层细胞出现细胞核固缩及空泡现象，熟地黄可降低神经功能评分，显著降低脑梗死体积，改善大脑皮层细胞病理现象；试剂盒检测结果显示，与假手术组比较，模型组LDH、MDA和铁含量显著升高(P<0.01),SOD、GPX4含量显著降低(P<0.01)，与模型组比较，熟地黄干预后LDH、MDA和铁含量显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD、GPX4含量明显升高(P<0.05,P<0.01)。缺血侧脑组织中自噬、铁死亡、神经功能损伤相关蛋白结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ表达显著升高(P<0.01),p62表达显著降低(P<0.01)；铁死亡相关蛋白TF、TFR1表达显著升高(P<0.01),FTH1、FPN1表达显著降低(P<0.01)；同时神经功能损伤相关蛋白BDNF、TrkB表达降低(P<0.01)，给予熟地黄后上述蛋白表达均得到改善。结论：熟地黄可能通过下调脑组织自噬水平，抑制铁死亡，改善缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤。

• 出版日期2024
• 单位河南中医药大学