摘要

采用ISSR-PCR技术对曼氏无针乌贼基因组DNA进行扩增,筛选分析了ISSR-PCR扩增时的主要影响因子,包括Mg2+浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Taq酶浓度以及退火温度,并用8条ISSR引物对舟山养殖群体进行了遗传多样性分析,最终确立的适用于曼氏无针乌贼ISSR扩增的25?l反应体系为:Mg2+1.5mmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,引物0.15?mol/L,dNTPs2.0mmol/L,退火温度为52.2℃。结果表明,扩增得到70个清晰的扩增位点,其中多态性位点60个,多态位点率为85.71%,Nei's基因多样性为0.3105±0.1760,Shannon's多样性指数为0...