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摘要
猪圆环病毒2型是一种常见的猪感染性病毒，Cap蛋白为猪圆环病毒2型的核衣壳蛋白，也是该病毒最主要的结构蛋白，是目前猪圆环病毒2型基因工程疫苗研制的关键蛋白。研究构建了Cap蛋白原核表达质粒pET28a-His-Cap，转化Transetta(DE3)表达菌株，IPTG诱导表达，经SDS-PAGE及蛋白免疫印迹试验验证，重组蛋白主要以可溶性形式表达，少数为包涵体蛋白。以Ni-NTA树脂进行蛋白纯化，纯化后蛋白浓度为629μg·mL-1，采用透析袋浓缩将重组蛋白浓缩，浓缩后蛋白终浓度为1.8 mg·mL-1。将重组蛋白与弗氏佐剂等体积混合，充分乳化后制备抗原，免疫兔子采集全血，分离血清。经蛋白免疫印迹试验，该多抗与重组蛋白存在免疫反应性，ELISA检测抗体效价可达1∶32 000,IFA试验证明该多抗能够特异性识别猪圆环病毒2型。Cap蛋白多克隆抗体的成功制备，为后续猪圆环病毒2型基因工程疫苗制备过程中验证Cap体外蛋白表达提供了材料。
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单位动物科技学院; 黑龙江八一农垦大学; 生命科学技术学院
