口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的制备和鉴定

作者：吴磊; 田美娜; 卢曾军; 付元芳; 孙普; 刘在新; 王建科

来源：中国兽医科学, 2010, 40(04): 331-336.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.04.002

• 口蹄疫病毒
• 3A蛋白
• 单克隆抗体

以原核表达并纯化的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得3株能稳定分泌抗3A蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为3H2、4B1、7F5,并对这3株单抗进行了生物学鉴定。结果显示,单抗3H2和4B1为IgG2a亚型,7F5为IgG2b亚型。单抗7F5针对的表位与3H2和4B1两株单抗的表位不一致;这3株单抗均能够与FMDV特异性结合,且单抗4B1与所有3A相关蛋白均反应。稳定性鉴定结果表明,获得的3株杂交瘤细胞均能稳定分泌单克隆抗体。研究结果为进一步探索3A蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。

• 出版日期2010
• 单位中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室