β-琼脂糖酶(AgaA7)在大肠杆菌中的表达、纯化及酶学性质研究

作者：王广慧

来源：佳木斯大学学报(自然科学版), 2008, (03): 416-420.

• &beta
• -琼脂糖酶(AgaA7)
• 表达
• 纯化
• 酶学性质 &beta
• -agarase(AgaA7)
• protein expression
• purification
• enzymatic characterization

为研究重组β-琼脂糖酶(AgaA7)基因的表达产物及其酶学性质,根据GeneBank中β-琼脂糖酶(AgaA7)基因的编码序列合成此基因后,将其克隆到表达载体pET-22b(+)中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.纯化后的表达产物经SDS-PAGE检测其相对分子质量并测定其酶学性质.结果表明:重组酶的相对分子质量为~5.0×104,与预期相符.此酶最适反应pH是7.0,在pH58的缓冲液中最稳定;最适反应温度为50℃,在低于50℃时比较稳定.Na+,K+,Ca2+,Mg2+对重组酶活性影响不大,而Zn2+,Hg2+,Pb2+则对酶活性具有不可逆抑制作用.

• 出版日期2008
• 单位绥化学院