葛根素调控miR-7抗小鼠肝细胞缺氧-复氧存活和细胞凋亡的作用机制

作者：张威; 王帅; 王喜梅; 张帆

来源：安徽医药, 2020, 24(09): 1718-1911.

• 葛根素
• 再灌注损伤
• 细胞低氧
• 小鼠肝细胞
• 细胞凋亡
• miR-7
• 核因子-κB

目的探讨葛根素对缺氧-复氧(H-R)诱导小鼠肝细胞损伤的影响及其分子机制。方法将小鼠肝细胞采用随机数字表法分为对照组、H-R组、不同浓度(70μmol/L、140μmol/L、280μmol/L、560μmol/L)葛根素组、H-R+葛根素组、H-R+miR-7组、H-R+miR-7阴性对照(miR-con)组、H-R+葛根素+anti-miR-7组、H-R+葛根素+anti-miR-7阴性对照(anti-miR-con)组、H-R+葛根素+佛波酯(PMA)组。实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-7水平,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、核因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达。结果葛根素预处理后,H-R小鼠肝细胞活性明显增强(P<0.05),Ki-67蛋白表达量、miR-7表达量显著增加(P<0.05)。与H-R组比较,280μmol/L葛根素预处理后,H-R小鼠肝细胞凋亡率[(14.72±1.20)%比(25.85±1.58)%]、Bax、NF-κB p65表达量降低,Bcl-2蛋白表达量增加(均P<0.05)。与H-R+miR-con组相比,过表达miR-7显著提高H-R小鼠肝细胞miR-7水平、细胞活性[(81.29±7.56)比(0.28±0.04)]、Ki-67、Bcl-2蛋白水平,降低细胞凋亡率[(15.65±1.56)%比(26.65±1.25)%]、Bax蛋白水平(均P<0.05)。干扰miR-7表达部分逆转葛根素对小鼠肝细胞H-R后细胞凋亡、Bax和NF-κB p65表达的抑制作用,以及部分逆转葛根素对小鼠肝细胞H-R后细胞活性、miR-7、Ki-67、Bcl-2表达的促进作用。结论葛根素显著促进H-R诱导的小鼠肝细胞增殖并抑制细胞凋亡,可能是通过调控miR-7表达,抑制NF-κB信号通路活性发挥作用。

• 出版日期2020
• 单位洛阳东方医院