自噬相关蛋白Beclin-1对PHEV复制增殖的影响

作者：苏晶晶; 李姿; 兰云刚; 吕晓玲; 赵魁; 刘丽颖; 贺文琦; 高丰

来源：中国兽医学报, 2018, 38(05): 956-961.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.05.19

• 猪血凝性脑脊髓炎病毒
• Beclin-1蛋白
• 自噬
• 复制增殖

首先利用荧光定量PCR和Western blot的方法分别从基因水平和蛋白表达水平检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomgelitis virus,PHEV)感染细胞对Beclin-1的影响,结果发现随着PHEV感染时间的增加Beclin-1表达呈现明显的上调趋势。其次,利用间接免疫荧光技术检测Beclin-1在PHEV感染后的N2a细胞中的定位变化,发现Beclin-1和PHEV呈现明显的共定位关系。随后构建Beclin-1的真核表达载体pCMV-FlagBeclin-1,将其转染至N2a细胞后接种PHEV,发现PHEV复制增殖特性并未受到显著影响。利用siRNA技术特异性敲低N2a细胞中的Beclin1水平,结果显示PHEV的表达量明显下调。本试验结果揭示了Beclin-1参与调控PHEV复制增殖的重要作用,为深入阐明PHEV致病机制提供了新的思路。

• 出版日期2018
• 单位吉林大学