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摘要
通过离子束注入后对甘草Glycyrrhiza uralensis种子用枸杞Lycium barum总DNA浸泡的方法,进行了离子束介导转基因的研究。试验初步表明:枸杞是理想的转化甘草的外源DNA供体;可将枸杞种子先进行离子束注入,再催芽成幼苗抽提总DNA;DNA溶液浓度以400μg/mL为宜;处理种子后的DNA溶液可以重复利用;在对甘草进行耐盐筛选时,400 mmol/L NaCl溶液催芽筛选最适宜;对裸胚或胚芽进行离子注入刻蚀后DNA处理,可提高转化率。故初步确定离子束介导转化甘草的技术参数如下:30 keV Ar+以900×2.6×1013ions/cm2的剂量注入甘草剥胚种子后,以400μg/mL的枸杞总DNA溶液浸泡种子24 h,之后进行盐胁迫催芽,从成活的转化后代中检测锗和硒的含量,有望获得耐盐性高并富含有益元素的优良甘草转基因材料。
- 出版日期2007-8-15
- 单位长江大学
