构建融合蛋白提高重组葡萄糖异构酶的催化性能

作者：邓辉; 王广林; 陈乃东; 韦传宝

来源：现代食品科技, 2016, 32(10): 52-59.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.10.009

• 融合蛋白
• 超嗜热菌
• Ⅱ型木糖/葡萄糖异构酶N端序列
• 催化性能
• 序列分析

为研究Ⅱ型Xylose/Glucose的N端蛋白序列对I型Xylose/Glucose的作用,实验将源自超嗜热菌Thermoanaerobacter thermohydrosulfuricus的Ⅱ型葡萄糖异构酶(TTGIase)N端31个氨基酸序列融合到嗜热菌Thermobifida fusca的Ⅰ型葡萄糖异构酶(TFGIase)的N端,构建了融合蛋白N-TFGIase。实验结果显示:在相同培养和诱导条件下,N-TFGIase,菌体单位浓度产酶量比TFGIase高出约40%,比酶活比TFGIase高出26%,最适温度比TFGIase高出5℃,75℃下的半衰期较TFGIase延长30%,最适pH较TFGIase降低1.0。序列分析表明:TTGIase N端序列的mRNA二级结构不形成有阻碍的颈环结构,提高了融合蛋白的表达效率;其含有的31个氨基酸残基的疏水性指数均小于0,利于融合蛋白的初始折叠和包装;其含有的酸性氨基酸残基比例约为碱性氨基酸残基比例的两倍,减小了酸性介质环境对融合蛋白分子表面的影响。

• 出版日期2016
• 单位中国科学院; 皖西学院